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Jul 10, 2023

완전 자동화된 Droplet Digital™ PCR을 통한 바이오의약품 제조 혁신

개발부터 품질 관리 및 지속적인 치료 평가까지 절대적인

개발부터 품질 관리 및 지속적인 치료 평가에 이르기까지 핵산의 절대 정량화가 바이오의약품 제품을 다음 단계로 끌어올리는 열쇠가 될 수 있습니다.

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세포 및 유전자 치료법은 암, 유전 질환, 자가면역 질환을 비롯한 광범위한 질병을 치료하기 위한 유망한 접근법으로 빠르게 떠오르고 있습니다. 이러한 치료법에는 유전 물질을 환자의 세포나 조직으로 전달하는 경우가 많으며, 유전자 발현, 세포 수, 바이러스 역가 등을 결정하기 위해 정확하고 정밀한 핵산 측정이 필요합니다.

이러한 치료법의 안전성과 효능을 보장하기 위해 바이오의약품 제조업체는 제품을 모니터링하고 분석할 수 있는 신뢰할 수 있는 도구가 필요합니다. 디지털 PCR(dPCR)은 복잡한 혼합물에서 핵산을 정밀하고 정확하게 정량화하기 위한 강력한 기술로 등장하여 세포 및 유전자 치료법 제조에 필수적인 도구가 되었습니다. 그러나 치료제 개발자와 제조업체는 제품 및 규제 제출에 대한 확신을 가지기 위해 최대한의 확실성을 확보해야 하므로 dPCR 시스템을 선택하고 워크플로에 적용할 때 분별력이 있어야 합니다.

전반적으로 디지털 PCR 기술은 일반적으로 정량적 PCR(qPCR)과 같은 다른 핵산 정량화 접근 방식보다 성능이 뛰어납니다. 그러나 최고의 정밀도와 정확성을 얻으려면 전문가가 각각의 장점과 한계가 있는 다양한 dPCR 방법과 플랫폼을 구별해야 합니다.

Droplet Digital™ PCR(ddPCR™)은 다른 dPCR 방법의 일부 한계를 극복할 수 있는 능력으로 인해 점점 인기를 얻고 있습니다. 일반적으로 칩, 플레이트 또는 마이크로어레이를 사용하여 샘플을 개별 반응 챔버로 분할하는 다른 dPCR 방법과 달리 ddPCR 분석은 물-오일 에멀젼 기술을 사용하여 샘플을 수천 개의 작은 물방울로 분할합니다. 이 방법은 교차 오염의 위험을 낮추고 더 높은 신호 대 잡음비와 더 적은 증폭 편향으로 더 정확하고 정확한 결과를 생성합니다.

ddPCR 기술의 또 다른 장점은 PCR 반응을 방해하고 위음성 결과를 초래할 수 있는 억제제에 대한 내성이 더 높다는 것입니다. ddPCR 분석은 또한 다른 dPCR 방법의 정확성과 정밀도에 영향을 미칠 수 있는 입력 DNA 또는 RNA의 양과 같은 반응 조건의 변화에 ​​덜 민감합니다. 이러한 문제로 인해 품질이 낮은 데이터가 생성되면 바이오제약 과학자는 실험을 반복해야 하므로 시간과 시약이 낭비됩니다. 또는 수동으로 임계값을 설정하고 결과를 해석할 고급 사용자를 찾아야 하므로 인적 오류가 발생할 가능성이 더 커집니다. ddPCR 기술로 이러한 문제를 최소화하면 전문가가 결과에 확신을 가질 수 있으며 이는 특히 첨단 바이오의약품에 매우 중요합니다.

정확하고 정확한 디지털 PCR 데이터는 관련된 높은 이해관계로 인해 세포 및 유전자 치료법 개발 및 제조에 매우 중요합니다. 이러한 치료법은 잠재적으로 환자의 삶을 변화시키는 치료법을 제공할 수 있지만, 제조 또는 투여 시 오류가 발생하면 심각한 결과를 초래할 수 있습니다. 부정확하거나 부정확한 데이터는 최적이 아닌 용량으로 이어질 수 있거나 잠재적으로 환자에게 해를 끼칠 수 있습니다. 또한, 다양한 세포 유형과 유전자 변형을 포함하는 이러한 치료법의 복잡한 특성으로 인해 표적 핵산의 정확한 정량화가 필요합니다. ddPCR 기술은 바이오의약품 생산 여정의 모든 단계에서 이러한 표적을 탐지하고 정량화하기 위한 강력한 도구를 제공합니다.

바이러스 역가 결정

아데노 관련 바이러스(AAV)는 유전자 치료에서 가장 일반적으로 사용되는 바이러스 벡터 중 하나입니다. AAV 기반 치료법의 투여량을 최적화하려면 바이러스 역가를 정확하게 정량화하는 것이 필수적입니다. 불행하게도 AAV 역가 측정을 위한 기존 분석법은 시간이 많이 걸리고 노동 집약적이거나 민감도가 부족할 수 있으며 결과는 여러 변수의 영향을 받습니다. 반대로, ddPCR 기술은 mL당 AAV 게놈을 보다 정확하고 정확하게 정량화할 수 있어 AAV 역가 결정을 위한 강력한 도구가 됩니다.